固相合成

1963年，Merrifield首次提出了固相多肽合成方法(spps)，由于其合成方便，迅速，成為多肽合成的首選方法，而且?guī)砹硕嚯挠袡C(jī)合成上的一次革命，并成為了一支獨(dú)立的學(xué)科——固相有機(jī)合成，固相合成的發(fā)明同時促進(jìn)了肽合成的自動化。世界上第一臺真正意義上的多肽合成儀出現(xiàn)在1980年代初期。

液相合成

基于將單個N-α保護(hù)氨基酸反復(fù)加到生長的氨基成份上，合成一步步地進(jìn)行， 通常從合成鏈的C端氨基酸開始，接著的單個氨基酸的連接通過用DCC，混合炭酐， 或N-carboxy酐方法實(shí)現(xiàn)。Carbodiimide方法包括用DCC做連接劑連接N-和C-保護(hù)氨基酸。重要的是， 這種連接試劑促接N保護(hù)氨基酸自己炭基和C保護(hù)氨基酸自由氨基間的縮水，形成肽鏈， 同時產(chǎn)出N，N?/FONT>-dyaylcohercylurea副產(chǎn)物。 然而， 此方法因其導(dǎo)致消旋的副反應(yīng)，或在強(qiáng)堿存在時形成5(4H)-oxaylones和N-acylurea而受到影響。慶幸地是， 這些副反應(yīng)能最小化，但是還不能完全消除。方法是加入象HOSU或hobt這樣的連接催化劑， 此外，此方法也可用于合成N保護(hù)氨基酸的活性酯衍生物。依次產(chǎn)生的活性酯將自發(fā)與任何別的C保護(hù)氨基酸或肽反應(yīng)形成新的肽