多肽在-20°C很穩(wěn)定,特別是冷凍干燥并保存在干燥器中.在將它們是露于空氣之前，冷凍干燥多肽可以放于室溫這將是濕度影響減少，當(dāng)無(wú)法冷凍干燥時(shí) ,最好的方法是馮小的工作樣量存放。
對(duì)于含Cys. Met oτTrP的多肽,脫氧緩沖劑對(duì)其濱解心不可少,因?yàn)檫@種多肽可易空氣氧化，在封瓶前,慢慢流討多肽的氣氣或氫氣也會(huì)降低氧化作用。含Gin或Asn的多肽也容易降解, 所有這些狀與不含這些有問(wèn)題解者的那些肽相比，生命期有限。多肽的溶解性
大多數(shù)隊(duì)的首選溶劑是超純抽氣水。稀乙酸或氨水分別劉于堿生或酸性多隊(duì)的溶解很重受。這些乃法不溶的多服,需要DMF.脲、guanleInlam chlorldesiacetonltnle米溶解，這些溶劑可能某些實(shí)驗(yàn)有副作用。所以我們建議設(shè)計(jì)多肽時(shí)要加注意。
殘基Ala, Cys , Ile, Leu, Met, Phe和Val將全增加多肽的溶解難度。
您需要特殊的多肽或任何技術(shù)幫助,請(qǐng)隨時(shí)與我們聯(lián)系。我們包你完全滿意;對(duì)丁我們不能適當(dāng)臺(tái)成的順序;我們不收費(fèi)。多肽的保存和操作
包裝1mg或更少的多肽按凈重包裝，聲明的小瓶重不含相關(guān)抗離子和水。例如,氦其酸分析決定的肽含量是80%，在1mg樣品中,那么瓶中專重是1.25mg。大量的多肽以毛重算。標(biāo)出的重量含相關(guān)抗離子和水，例如, 25mg樣品中肽百分比為90% ,那么,實(shí)際肽量為25mgx90%=22.5mg
不要把肽含量和純度搞混了。肽的純度可能是100%，而肽含量相關(guān)帶電基團(tuán)(如Arg,lys) 的抗離子量和肽親水性決定。這是合成肽的本身特性。凍干肽的保存所有產(chǎn)品應(yīng)存于冰箱。最好為-20C.多數(shù)肽以此方法可以存放幾年不變.肽溶液的保存
溶液肽遠(yuǎn)比凍干形式不穩(wěn)定，溶液應(yīng)為中性pH(pH5-7), -20*C保存的,為群務(wù)樣品的反復(fù)凍融，最好分成小樣存放。 -份樣品融凍后未用宗，應(yīng)扔掉,細(xì)榮降解有時(shí)會(huì)成為浴波肽的麻煩,為完服此;肽應(yīng)浴于無(wú)菌水，或肽溶汝用D.2μ M潔膜過(guò)濾。多隊(duì)的重建和操作
多數(shù)肽溶于無(wú)菌蒸留水。初次溶解時(shí), 要注急使初始濃度比要求濃度人;如果多肽僅有限溶解性，這更允許加入其它溶解劑或緩沖鹽。如果多肽在水中的溶解性有限，有幾種選擇可幫助溶解;對(duì)堿性肽用稀乙酸(含Arg，Lys,llis)酸性肽用稀氨水(含Asp,Glu)
對(duì)極疏水的肽用10%有機(jī)修飾物( Acetonitnile , Methanol)極不溶的肽用DM50或DMF guani:line hydrochloride或脲的濃溶液也很有用，與上述方法合用，聲處理也是溶解多肽的有效手段.多肽應(yīng)用和保存
多肽具廣泛的溶解性。多肽不溶的主要問(wèn)題是形成_級(jí)結(jié)構(gòu)。 除了最太肽外,這宗都會(huì)發(fā)生，在有多重疏水殘基的肽中更顯善。鹽會(huì)促進(jìn)_級(jí)結(jié)構(gòu)形成。 我J建議先在無(wú)菌蒸餾水或去離子4溶解多服。如需要勖溶解率,可用聲處理。溶解仍有問(wèn)題，加少重稀乙酸(10%)或氨水，會(huì)更于溶解。
要長(zhǎng)期保存多肽，最好冷凍干燥,冷干粉可在20C或更低存放幾年而很少或無(wú)降解。溶液中的多肽遠(yuǎn)不穩(wěn)定。多肽易受細(xì)菌降解 ，應(yīng)用無(wú)菌純化小水溶解。
含有Met Cgs或Try殘基的多肽溶液由于氧化,壽命有限。應(yīng)溶于無(wú)氧溶劑，為防山重復(fù)凍融的破壞，建議溶解過(guò)量的馱的便實(shí)驗(yàn)，其余多肽以固體形成保存。HPLC分析和純化
分析HPLC使用柱子和泵系統(tǒng), 可以經(jīng)受傳遞高壓，這樣可以用極細(xì)的微粒(3-10μm)做填料。由此多肽要在幾分鐘內(nèi)高度被分析。
HPLC分兩類:離子交換和反相。離子交換HPLC依靠多肽和固相間的直接電荷相互作用。 柱子在-定PH范圍帶有特定電荷衍變成一種離子休,而多肽或多肽混合物，由其氦其酸組成表現(xiàn)出相反電荷。分離是一 種電荷相互作用, 通過(guò)可變PH,離子強(qiáng)度，或兩者洗脫出多肽，通常，先用低離子強(qiáng)度的溶液,以后逐漸加強(qiáng)或一5-步加強(qiáng) ,直到多肽火柱中洗脫出。離子交換分離的一個(gè)列子使用強(qiáng)陽(yáng)離子交換柱.如sulfnethylaspartimide: 面過(guò)酸性PH中帶正電來(lái)分離.
反相HPLC條件與正常層析正相反。多肽通過(guò)疏水作用連到柱上,用降低離子強(qiáng)度洗脫，如增加洗脫劑的疏水性。通常柱子由共價(jià)吸附到硅上的碳?xì)渫殒湗?gòu)成,這種鏈長(zhǎng)度為G4-G8碳原子。由于洗脫是-種疏水作用。長(zhǎng)鏈柱比短鏈對(duì)小的,高帶電肽好。另一方面大的疏水肽用短鏈柱洗脫好。然而,總體實(shí)踐中,這兩類柱互變無(wú)多少顯著差別,別，類載體由碳水化合物構(gòu)成，比如苯基。
典型的操作常由兩綬沖劑組成, 0.1%TFA-H2o和80% acetonitrile 0.1%TFA--H2o稀acetonitrile.用線型梯變以每分鐘0.5%到1.0%改變的速度混合。常見(jiàn)分析和純化用柱為4.6x 250mm(3-10μ m)和22x 250mm(10μ m).如果用徑向填柱，那么大小是8x100 (3-10μm)和25x250mm(10μm)
大量各種緩沖劑含許多不同試劑,比如heptafluorobutyric酸,0.1%磷酸，稀He formic酸(5-6%,pH2-4), 10-100mM NH4HCO3,醋酸鈉/氨, TFA/TEA ,磷酸鈉或鉀,異戊酚。這樣許多不同組合可形成緩沖劑,但要注意一點(diǎn):硅反相柱料不能長(zhǎng)時(shí)間暴露于高pH,甚至微堿pH，因?yàn)檫@樣會(huì)破壞柱子。

以上就是多肽合成給大家介紹的相關(guān)內(nèi)容，希望對(duì)大家有所幫助。